Flere bånd i pcr

En af de sandsynlige årsager til flere bånd i PCR er uspecifik primerglødning. ... For mange PCR -cykler (mere end 30) har også potentiale til at forårsage flere bånd på grund af den øgede chance for fejl med hver cyklus. DNA -kontaminering er en anden mulig faktor.

1. Hvorfor er der flere bånd i gelelektroforese?
2. Hvordan foretager du fejlfinding af flere bånd i PCR?
3. Hvad er PCR -bånd?
4. Hvorfor er der flere bands i RAPD?

Hvorfor er der flere bånd i gelelektroforese?

Gelmatricen fungerer som en sigte: mindre DNA -molekyler vandrer hurtigere end større, så DNA -molekyler af forskellige størrelser adskilles i forskellige bånd under elektroforese.

Hvordan foretager du fejlfinding af flere bånd i PCR?

Populære svar (1)

1. udfør reaktionen med en negativ kontrol (ingen skabelon). ...
2. Forøg udglødningstemperaturen. ...
3. Omdesign primerne og gør 3 ′ længere. ...
4. Forøg glødetid, hvis de ikke-specifikke produkter er kortere end dit mål. ...
5. Brug mindre DNA -skabelon.
6. Prøv touch-down PCR.

Hvad er PCR -bånd?

Det svage øvre bånd (298 bp) identificerer et PCR -produkt amplificeret fra et enkelt mål i genomet. Det lysere nedre bånd (238 bp) identificerer et multi-target PCR-produkt med 10 kopier af gentagelser i det samme genom. Begge disse målområder indeholder 100% identiske bindingssteder for primerne.

Hvorfor er der flere bands i RAPD?

Da RAPD'er genereres ved tilfældig annealing ved hjælp af en 10-nukleotidprimer, kunne man forvente at have et antal fragmenter efter hver primer, der blev brugt. ... Afhængigt af hvad du sammenligner (mere eller mindre genetisk relateret) vil antallet af polymorfe bånd variere.